电泳所需的仪器有:电泳槽和电源。
1.电泳槽
电泳槽是电泳系统的核心部分,根据电泳的原理,电泳支持物都是放在两个缓冲液之间,电场通过电泳支持物连接两个缓冲液,不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有:
(1)圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细.
(2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在块垂直放置的平行玻璃板中间.
(3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座,冷却板和电极.
电源
要使荷电的生物大分子在电场中泳动,必须加电场,且电泳的分辨率和电泳速度与电泳时的电参数密切相关。不同的电泳技术需要不同的电压,电流和功率范围,所以选择电源主要根据电泳技术的需要.如聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳需要200~600V电压。
电泳介质的pH值
溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质所带净电荷的多少.对蛋白质,氨基酸等类似两性电解质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快,反之越慢。因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白质的有效分离.为了保证电泳过程中溶液的pH值恒定,必须采用缓冲溶液。
移动界面电泳
是将被分离的离子(如阴离子)混合物置于电泳槽的一端(如负极),在电泳开始前,样品与载体电解质有清晰的界面。电泳开始后,带电粒子向另一极(正极)移动,泳动速度快的离子走在前面,其他离子依电极速度快慢顺序排列,形成不同的区带。只有个区带的界面是清晰的,达到完全分离,其中含有电泳速度快的离子,其他大部分区带重叠。
酸洗液一般是由无机酸加上定量的缓鉵剂,抑制剂或者表面活性剂等涂加剂制成的,它们的性能和处理效果不仅取决地其中起主导作用的酸种类和性能,而且还取决于这种酸与其中添加剂的成份及其在水中的含量和之间的配比。酸洗原理中重要的一点是酸与铁作用时产生氢气,使金属基体表面的氧化皮机械的剥落,氢气既有使基体表面氧化皮剥落的正面作用,同时过量的氢气又有腐鉵金属的品格,导致金属表面充氢,使金属变脆的负面影响,为了减轻“氢脆“对基体的损伤,在酸中加入合适的缓鉵剂,缓鉵剂能在金属基体表面形成一层分子膜,以阻碍酸的进一步作用,从而达到缓蚀的目的,抑制剂则有抑制氢气的掸发比而起到减轻酸雾挥发的作用,在酸液中加入一定量的表面活性剂,可使洗液具有除油除锈的双重作用。